Nuwe Coronavirus (SARS-Cov-2) Nukleïensuur Opsporing Kit
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluertsscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Produkt name 】Nuwe Coronavirus (SARS-Cov-2) Nukleïensuur Opsporing Kit (Fluorescent RT-PCR Probe Metode)
【Packaging specifications 】25 toetse/stel
【Intended usouderdom】
Hierdie stel word gebruik vir die kwalitatiewe opsporing van nukleïensuur van nuwe koronavirus in nasofaryngeale deppers, orofaryngeale (keel) deppers, anterior neusdeppers, mid-turbinate deppers, neusspoelings en nasale aspirate van individue wat deur hul gesondheidsorgverskaffer van COVID19 verdink word. Die opsporing van ORF1ab- en N-gene van die nuwe koronavirus kan gebruik word vir hulpdiagnose en epidemiologiese monitering van nuwe koronavirusinfeksie.
【Principles of the prosiedure 】
Hierdie stel is ontwerp vir spesifieke TaqMan-probes en spesifieke primers wat ontwerp is vir die nuwe koronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab en N geenvolgorde. Die PCR-reaksie-oplossing bevat 3 stelle spesifieke primers en fluoresserende probes vir spesifieke opsporing van teikens, en 'n addisionele stel spesifieke primers en fluoresserende probes word gebruik as die interne standaardbeheer van die kit vir die opsporing van endogene huishoudelike gene.
Die toetsbeginsel is dat die spesifieke fluoresserende sonde deur die eksonuklease-aktiwiteit van die Taq-ensiem in die PCR-reaksie verteer en afgebreek word, sodat die verslaggewer fluoresserende groep en die geblusde fluoresserende groep geskei word, sodat die fluoressensie moniteringstelsel 'n fluoresserende stelsel kan ontvang. sein, en dan Deur die verrykingseffek van PCR-versterking, bereik die fluoressensiesein van die sonde 'n vasgestelde drempelwaarde-Ct-waarde (siklusdrempel). In die geval van geen teikenamplikon nie, is die verslaggewergroep van die sonde naby aan die blusgroep. Op hierdie tydstip vind die fluoressensie-resonansie-energie-oordrag plaas, en die fluoressensie van die verslaggewergroep word deur die blusgroep geblus, sodat die fluoresserende sein nie deur die fluoresserende PCR-instrument opgespoor kan word nie.
Om die gebruik van reagense tydens die toets te monitor, is die stel toegerus met positiewe en negatiewe kontroles: die positiewe kontrole bevat die teikenplek rekombinante plasmied, en die negatiewe kontrole is gedistilleerde water, wat gebruik word om omgewingsbesoedeling te monitor. Dit word aanbeveel om 'n positiewe kontrole en 'n negatiewe kontrole gelyktydig te stel tydens toetsing.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Komponents | |
| Name | Spesifikasie | Quantity | Quantity | |
| Positiewe beheer | 180 μL/flessie | 1 | 1 | Kunsmatig gekonstrueerde plasmiede, Gedistilleerde water |
| Negatiewe beheer | 180 μL/flessie | 1 | 1 | Gedistilleerde water |
| SARS-Cov-2-mengsel | 358,5 μL/flessie | 1 | / | Spesifieke primer pare, spesifieke opsporing fluoresserende probes, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Gedistilleerde water, ens |
| Ensiemmengsel | 16,5 μL/bottel | 1 | / | Taq-ensieme, omgekeerde transkriptase, UNG-ensieme, ens. |
| SARS-Cov-2-mengsel (gevriesdroogde) | 25 toetse/bottel | / | 1 | Spesifieke primer-pare, spesifieke opsporing fluoresserende probes, dNTP's, Taq-ensieme, omgekeerde transkripsie, gedistilleerde water, ens. |
| 2x buffer | 375 μL/bottel | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Gedistilleerde water, ens. |
Let wel:(1) Die komponente in verskillende bondelstelle kan nie gemeng of omgeruil word nie.
(2) Berei jou eie reagens voor: Nukleïensuur-ekstraksiestel.
【Storage conditions en expiration date 】
For BST-SARS-25:Vervoer en stoor vir 'n lang tyd by -20±5℃.
For BST-SARS-DR-25:Vervoer by kamertemperatuur. Berg by -20±5℃ vir 'n lang tyd.
Vermy herhaalde vries-ontdooi siklusse. Die geldigheidstydperk word voorlopig vir 12 maande gestel.
Sien die etiket vir die datum van vervaardiging en gebruik.
Na die eerste opening, kan die reagens by -20±5 ° C gestoor word vir nie meer as 1 maand of tot die einde van die reagensperiode, watter datum ook al eerste kom, om herhaalde vries-ontdooi-siklusse en die aantal reagensbevriesing te vermy -ontdooi-siklusse moet nie 6 keer oorskry nie.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1. Toepaslike monstertipe: Onttrekte nukleïensuuroplossing.
2. Monsterberging en vervoer: Berg by -20±5℃ vir 6 maande. Vries en ontdooi die monsters nie meer as 6 keer nie.
【Tgeskatteing method】
1.Nucleic acid extraction
Kies 'n geskikte nukleïensuur-ekstraksiestel om virale nukleïensuur te onttrek, en volg die ooreenstemmende stelinstruksies. Dit word aanbeveel om 'n nukleïensuur-ekstraksie- en suiweringstel te gebruik wat deur Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. of ekwivalente nukleïensuursuiweringstel vervaardig word.
2. Reaktion reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Verwyder die SARS-Cov-2-mengsel en ensiemmengsel, smelt heeltemal by kamertemperatuur, meng deeglik met Vortex-toestel en sentrifugeer dan kortliks.
(2) 16.5uL Ensiemmengsel is by 358.5uL SARS-Cov-2 Mengsel gevoeg en deeglik gemeng om die gemengde reaksie oplossing te verkry.
(3) Berei 'n skoon 0.2 mL PCR oktale buis voor en merk dit met 15uL van die bogenoemde gemengde reaksie oplossing per put.
(4) Voeg 15 μL gesuiwerde nukleïensuuroplossing, die positiewe kontrole en die negatiewe kontrole by, en bedek die oktale buisdop versigtig.
(5) Meng goed deur onderstebo om te draai en sentrifugeer vinnig om die vloeistof onder in die buis te konsentreer.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Voeg 375ul 2x Buffer by SARS-Cov-2 Mengsel((Gevriesdroogde) om die reaksiemengsel voor te berei. Meng deeglik deur te pipet en sentrifugeer dan kortliks. （Sodra reaksiemengsel voorberei is, word dit aanbeveel om by -20℃ te stoor by langtermyn berging.)
(2) Berei 'n skoon 0.2 mL PCR oktale buis voor en merk dit met 15μL reaksiemengsel per put.
(3) Voeg 15μL gesuiwerde nukleïensuuroplossing, die positiewe kontrole en die negatiewe kontrole by, en bedek die oktale buisdop versigtig.
(4) Meng goed deur onderstebo om te draai en sentrifugeer vinnig om die vloeistof onder in die buis te konsentreer.
3. PCR amplification (Verwys asseblief na die instrumenthandleiding vir bedieningsinstellings.）
3. 1 Plaas die PCR 8-buis in die monsterkamer van die fluoresserende PCR-instrument, en stel die monster wat getoets moet word, die positiewe kontrole en die negatiewe kontrole volgens die volgorde van laai.
3.2 Fluoresensie-opsporingskanaal:
(1) ORF1ab geen selekteer die opsporingskanaal van FAM (Verslaggewer: FAM, Quencher: Geen).
(2) N-geen selekteer die opsporingskanaal van VIC (Verslaggewer: VIC, Quencher: Geen).
(3) Interne standaardgeen selekteer die opsporingskanaal van CY5 (Verslaggewer: CY5, Quencher: Geen).
(4) Die Passiewe Verwysing is op ROX gestel.
3.3 PCR program parameter instelling:
| Stap | Temperatuur (℃) | Tyd | Aantal siklusse | |
| 1 | Omgekeerde transkripsie reaksie | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Taq ensiem aktivering | 95 | 2,5 min | 1 |
| 3 | Taq ensiem aktivering | 93 | 10 s | 43 |
| Uitgloeiing verlenging en fluoressensie verkryging | 55 | 30 s | ||
Nadat u dit opgestel het, stoor die lêer en voer die reaksieprogram uit.
4.Results analysis
Nadat die program geëindig het, word die resultate outomaties gestoor, en die versterkingskurwe word ontleed. Die versterkingskurwe is ingestel op die instrument se verstekdrempel.
【Explanation of test results 】
1. Bepaal die geldigheid van die eksperiment: Die positiewe kontrole FAM, VIC kanaal moet 'n tipiese amplifikasie kurwe hê, en die Ct waarde is oor die algemeen minder as 34, maar kan wissel as gevolg van verskillende drempel instellings van verskillende instrumente. Die negatiewe beheer FAM, VIC kanaal moet nie-versterkte Ct wees. Daar word ooreengekom dat bogenoemde vereistes terselfdertyd nagekom moet word, anders is hierdie toets ongeldig.
2. Gevolg oordeel
| FAM/VIC-kanaal | Uitslag van oordeel |
| Ct＜37 | Monstertoets is positief |
| 37≤Ct＜40 | Die versterkingskromme is S-vormig, en verdagte monsters moet weer ondersoek word; as die hereksamenuitslae konsekwent is, word dit as positief beoordeel, anders is dit negatief |
| Ct≥40 of geen versterking nie | Monstertoets is negatief (of onder die onderste limiet van kit opsporing) |
Let wel: (1) Indien beide die FAM-kanaal en die VIC-kanaal op dieselfde tyd positief is, word die SARS-Cov-2 as positief bepaal.
(2) Indien die FAM-kanaal of VIC-kanaal positief is en die ander kanaal is negatief, moet die toets herhaal word. As dit terselfdertyd positief is, sal dit as SARS-Cov-2 positief beoordeel word, anders sal dit as SARS-Cov-2 negatief beoordeel word.
Verwante produkte
-
COVID-19 IgM/IgG Teenliggaam Opsporing Kit
COVID-19 IgM/IgG Teenliggaam Opsporing Kit (Kolloïdale Goud Immunochromatografie Metode) Produkhandleiding 【PRODUKNAAM】 COVID- 19 IgM/IgG Teenliggaam Opsporing Kit (Kolloïdale Goud Immunochromatografie Metode) 【PAKKINGSSPESIFIKASIES】Kits 1, Toets 0 OPSOMMING】 Die nuwe koronavirusse behoort aan die β-genus. COVID-19 is 'n akute respiratoriese aansteeklike siekte. Mense is oor die algemeen vatbaar. Tans is die pasiënte wat deur die nuwe koronavirus besmet is die hoofbron ...
-
Nukleïensuur-ekstraksie- of suiweringsstel
Nukleïensuur-ekstraksie- of suiweringsstel of gestoor by -20 ℃. Die monster moet met 0℃ krul vervoer word. Inleiding Die Nukleïensuur-ekstraksie- of -suiweringsstel (Magnetiese krale-metode) is ontwerp vir die outomatiese suiwering van RNA en DNA uit liggaamsvloeistowwe (soos deppers, plasma, serum) deur gebruik te maak van outomatiese nukleïensuur-ekstraksie-instrumente. Magnetiese deeltjie-tegnologie verskaf hoë-gehalte DNA/RNA wat geskik is vir ...
-
SARS-CoV-2-antigeentoetsstel （Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Antigeen Assay Kit (Immunochromatography Method) Produkhandleiding 【PRODUKNAAM】 SARS-CoV-2 Antigeen Assay Kit (Immunochromatography Method) 【VERPAKKINGSSPESIFIKASIES】 1 Toets/Kit 【ABSTRACT】 behoort aan die nuwe koronavirus genus. COVID-19 is 'n akute respiratoriese aansteeklike siekte. Mense is oor die algemeen vatbaar. Tans is die pasiënte wat deur die nuwe koronavirus besmet is die belangrikste ...
-
SARS-CoV-2-antigeentoetsstel
SARS-CoV-2-antigeentoetsstel （Immunochromatografiemetode) Produkhandleiding 【PRODUKNAAM】SARS-CoV-2-antigeentoetsstel （Immunochromatografiemetode) 【VERPAKKINGSSPESIFIKASIES】 1 toets/stel ,25toetse/stel, 25 toetse/stel, 1. nuwe koronavirusse behoort tot die β-genus. COVID-19 is 'n akute respiratoriese aansteeklike siekte. Mense is oor die algemeen vatbaar. Tans is die pasiënte wat deur die nuwe koronavirus besmet is, die hoofbron van infeksie; asimptomatiese besmette mense...